液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。
根據固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。現代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點。
系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。
液相色譜儀譜圖常見術語:
1、色譜曲線(romatogram):色譜柱流出物通過檢測器系統時所產生的響應信號對時間或流動相流出體積的曲線圖,或者色譜圖通過適當的方法觀察到的紙色譜或薄層色譜斑點、譜帶的分布圖。
2、色譜峰(chromatographic peak):色譜柱流出組分通過檢測器系統時所產生的響應信號的微分曲線。
3、峰底(peak base):峰的起點與終點之間的連接的直線。
4、峰高(h,peak height):色譜峰大值點到峰底的距離。
5、峰寬(W,peak width):在峰兩側拐點處所作切線與峰底相交兩點的距離。
6、半高峰寬(W h/2,peak withd at half height):通過峰高的中點作平行于峰底的直線,此直 線 與峰兩側相交兩點之間的距離
7、峰面積(A,peak area):峰與峰底之間的面積
8、拖尾峰(tailing peak):后沿較前沿平緩的不對稱的峰。
9、前伸峰(leading peak):前沿較后沿平緩的不對稱的峰(又叫伸舌峰、前延峰)。
10、假峰(ghost peak):除組分正常產生的色譜峰外,由于儀器條件的變化等原因而在譜圖上出現的色譜峰,即并非由試樣所產生的峰。這種色譜峰并不代表具體某一組分,容易給定性、定量帶來誤差(又叫鬼峰)。
11、畸峰(distrorted peak):形狀不對稱的色譜峰, 前伸峰、拖尾峰都屬于這類。
12、反峰(negative peak):也稱倒峰、負峰,即出峰的方向與通常的方向相反的色譜峰。
色譜峰常見問題解決方法